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外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯状形态、双层膜结构,天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括肿瘤细胞在内几乎所有类型的细胞(免疫细胞、神经细胞、干细胞),都可以产生并释放exosome。
miRNA是一类22nt左右大小的非编码分子, 它可以通过外泌体从一个地方转运到另外一个地方行使基因沉默功能。通过检测外泌体中miRNA表达变化,可以发现外泌体中miRNA特异性功能。

技术简介
外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡,直径约为30-200 nm,形态也呈现出多样性。长链非编码RNA(long non-coding RNA)是一类转录本长度超过200nt、不编码蛋白的RNA。 近年来的研究表明lncRNA能在标贯遗传、转录及转录后水平上调控基因表达,参与了X染色体沉默、基因组印记以及染色质修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等多种重要的调控过程,与人类疾病的发生、发展和防治都有着密切联系。

测序程序
1. RNA提取
2. 逆转录合成cDNA1链
3. 合成cDNA2链
4. 体外转录合成cRNA
5. 随机引物合成正义链DNA
6. DNA产物片段化
7. Cy3标记
8. 芯片杂交
9. 数据分析

服务类型
外泌体提取(超速离心法/试剂盒法/磁珠法),来源:细胞培养上清、血清、血浆、脑脊液、腹水、胸水、尿液、组织样本 等等。
外泌体鉴定(NTA粒径、透射电镜、WB[CD9/CD81/CD63/HSP70]、流式检测)
外泌体示踪/细胞对外泌体摄取行为
外泌体流式检测、外泌体载药(siRNA、质粒等)
外泌体高通量测序(miRNA/lncRNA)、外泌体lncRNA/circRNA芯片检测
外泌体miRNA/lncRNA/mRNA/circRNA定量PCR检测
外泌体蛋白质组学检测(Label-free/iTRAQ/TMT)
外泌体动物功能研究(外泌体注射动物、皮下荷瘤、活体成像、免疫荧光等)
外泌体细胞功能检测(细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移/侵袭等)
外泌体miRNA靶基因验证:双荧光素酶报告基因检测
外泌体整体课题服务(外泌体方案定制设计+实验等)

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