目录号:E373-YH01-01A
产品描述:
CRISPR/Cas是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR相关蛋白Cas9已经广泛应用于基因组编辑,相比于Cas9蛋白,Cas12a具有类似的基因组编辑效率,但具有较低的脱靶效率,在基因治疗应用中具有巨大的潜力。
不同于Cas9蛋白,Cas12a不需要tracrRNA,只需要单个由41-44nt核苷酸组成的crRNA引导。这非常有利于基因组编辑,因为Cas12a不仅比Cas9小,而且还具有较小的crRNA分子(接近Cas9的总sgRNA的一半)。与Cas9需要富含G的PAM相反,Cas12a-crRNA复合物通过识别富含T(5'-TTTN-3')的PAM基序来切割靶DNA。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了4或5个核苷酸突出的粘性末端。这促使Cas12a可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。
本制品在蛋白两端分别加了核定位信号(NLS),当Cas12a以NLS序列表达时,Cas12a-RNP复合体可以在进入细胞后立即定位到细胞核。无需体内转录或翻译,提高了该方法在质粒系统上的效率。
产品特点:
1) 纯蛋白体系,避免CRISPR基因敲除时引入质粒或病毒干扰;
2) 可显著降低脱靶效应。
产品用途:
1) 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲除;
2) 基于蛋白与sgRNA转染的非病毒载体CRISPR基因敲入;
3) sgRNA 剪切靶点DNA 效率检测,降低体内筛选成本;
4) 体外剪切靶DNA的特异位点。
保存温度:
-20℃保存,或-80℃长期保存。
应用实例:
图例)Cas12a Nuclease 做DNA 片段体外切割活性检测。
带有靶位点的DNA 片段约为2000bp,酶切后的片段为1600bp 和400bp。
For research use only.
技术支持:易动力网络