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CRISPR-DNA 等温快速扩增冻干球(荧光型)

本试剂盒利用高敏恒温扩增(H-SIA)以及 CRISPR/Cas(基因编辑核酸检测技术)开 展核酸检测。 首先对核酸样本进行高敏恒温扩增(H-SIA),然后向扩增产物中加入 CRISPR 反应体 系并进行恒温反应。若反应体系中的 crRNA(序列中含有与 Cas 蛋白结合的回文序列和与目 的基因序列互补的特异序列)识别到扩增产物中的目的基因序列,则激活 Cas 蛋白的切割活 性,剪切反应体系中的报

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超敏 CRISPR-DNA 等温快速扩增检测冻干球(试纸条型).png

产品名称 CRISPR-DNA 等温快速扩增冻干球(荧光型) 


2.原理概述 本试剂盒利用高敏恒温扩增(H-SIA)以及 CRISPR/Cas(基因编辑核酸检测技术)开 展核酸检测。 首先对核酸样本进行高敏恒温扩增(H-SIA),然后向扩增产物中加入 CRISPR 反应体 系并进行恒温反应。若反应体系中的 crRNA(序列中含有与 Cas 蛋白结合的回文序列和与目 的基因序列互补的特异序列)识别到扩增产物中的目的基因序列,则激活 Cas 蛋白的切割活 性,剪切反应体系中的报告 RNA,报告 RNA 被剪切后会发出荧光被仪器检测出荧光信号; 若扩增产物不含目的基因序列,则不激活 Cas 蛋白,报告 RNA 不被剪切,无荧光信号被采集。

 

3.主要组成成分 

主要成分.png

4.产品特点 

4.1 外观:试剂盒包装完整,模板稀释液无漏液。 

4.2 检测下限:检测自建体系性能达到 100 copy/mL。不同体系检测性能会略有差异。 

4.3 重复性:试剂检测同一样本 10 次,结果均一致。 


5.有效期 

2-8℃避光下有效期为 12 个月。28±2℃避光保存下有效期为 个月。 


6.操作步骤 

6.1 准备模板:采用模板稀释液按照试验要求稀释模板。 


6.2 H-SIA 等温扩增:取 1.5 ml 离心管放入 颗 H-SIA 球,加入引物探针,加入 45.5 µl 模 板(终体积为 50ul),轻弹几次混匀。后 42℃孵育 20 min。 

注:F/R 引物推荐用量:10 µM,各加入 1-2µl; 探针推荐用量:500-1000 ng/T。可根据要求进行调整。

 

6.3 CRISPR 剪切反应:将 个 CRISPR 冻干球放入 反应管中,加入 45 ul 水溶解,加入 crRNA,加入 5uL 等温扩增产物,上下颠倒混匀后离心。后将 联排放于荧光定量 PCR 中, 37℃恒温反应,30s 采集一次信号(FAM 通道),设置 60 个循环。 注:crRNA 推荐用量:100-500ng/T。可根据体系进行调整。 检测通道可根据引物探针不同进行更改。

 

7.注意事项 

7.1 本试剂用于体外检测,仅供科研使用,使用前请仔细阅读本说明书。 

7.2 本试剂盘应严格按照说明书要求储存,必需在有效期内使用。 

7.3 应按说明书严格进行操作,请勿混合使用不同批次组分。操作失误或样本量过少都有可 能导致检测结果出现偏差。 

7.4 如果试剂盒包装损坏、有破损、漏气等,请不要使用该产品。 

7.5 试剂袋中的稀释液、干燥剂不得吞服。稀释液中含有少量防腐剂,可能对皮肤和眼睛造 成刺激。如果该溶液接触到皮肤或眼睛,立即用大量清水冲洗。 如发生皮肤刺激或皮疹,应及时就诊。操作时应注意做好安全防护措施,使用前后清洗或消毒双手。


版权所有:默瑞(上海)生物科技有限公司   

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