TwistDx,enzymatics,KAPA,Echelon,ChromoTek,Nanocs,默瑞生物

咨询热线:4006-400-850

收藏
当前位置:首页 > 默瑞产品
默瑞产品 联系我们
< >
超敏 CRISPR-DNA 等温快速扩增检测冻干球(试纸条型)

超敏 CRISPR-DNA 等温快速扩增检测冻干球(试纸条型).png 产品名称 超敏 CRISPR-DNA 等温快速扩增冻干球(试纸条型) 2.原理概述 本试剂盒利用高敏恒温扩增(H-SIA)以及 CRISPR/Cas(基因编辑核酸检测技术)对 样本中 DNA 进行检测。检测结果以试纸条形式呈现。 首先对核酸样本进行高敏恒温扩增(H-SIA),然后向扩增产物中加入 CRISPR 反应体

  • 产品介绍
  • 规格参数
  • 售后服务

超敏 CRISPR-DNA 等温快速扩增检测冻干球(试纸条型).png

产品名称 超敏 CRISPR-DNA 等温快速扩增冻干球(试纸条型) 

2.原理概述 本试剂盒利用高敏恒温扩增(H-SIA)以及 CRISPR/Cas(基因编辑核酸检测技术)对 样本中 DNA 进行检测。检测结果以试纸条形式呈现。 

首先对核酸样本进行高敏恒温扩增(H-SIA),然后向扩增产物中加入 CRISPR 反应体 系并进行恒温检测。若反应体系中的 crRNA(序列中含有与 Cas 蛋白结合的回文序列和与目 的基因序列互补的特异序列)识别到扩增产物中的目的基因序列,则激活 Cas 蛋白的切割活 性,剪切反应体系中的报告 RNA,报告 RNA 被剪切后会发出荧光被仪器检测出荧光信号; 若扩增产物不含目的基因序列,则不激活 Cas 蛋白,报告 RNA 不被剪切。 

CRISPR 免疫层析试纸显色原理(消线法):试纸结合垫中含有鼠源抗 FITC 抗体标记的 乳胶微球,可与报告 RNA 上的 FAM 标记结合,形成完整的“生物素-报告 RNA-FAM-FITC- 乳胶微球”

复合物:试纸 T 线处包被有链霉亲和素,可与生物素结合,质控线 C 线处包被 有羊抗鼠二抗,可与抗 FITC 抗体结合。若无目的基因序列,则报告 RNA 未被 Cas 蛋白剪 切,反应体系在经过 T 线时,完整的“生物素-报告 RNA-FAM-FITC-乳胶微球”复合物 与链霉亲和素结合,则 T 线显色;若有目的基因序列,则报告 RNA Cas 蛋白剪切,反应 体系在经过 T 线时,切割后形成的“FAM-FITC 抗体-乳胶微球”复合物无法与链霉亲和 素结合,则 T 线不显色。无论报告 RNA 是否被剪切质控线 C 线均能够与复合物中过量的“抗 FITC 抗体-乳胶微球”结合而显色。 

3.主要组成成分 产品组成 主要成分 规格 CRISPR-DNA 检测冻干球 基础型 H-SIA 冻干球 扩增试剂冻干球 48T/基础型 CRISPR 冻干球 检测试剂冻干球 模板稀释液 Mg 2+溶液 48T/试纸条 乳胶微球、NC 膜等 48T/

4.产品特点 

4.1 外观:试剂盒包装完整,模板稀释液无漏液。 

4.2 检测下限:检测自建体系性能达到 100 copy/mL。不同体系检测性能会略有差异。 

4.3 重复性:试剂检测同一样本 10 次,结果均一致。 

5.有效期 2-8℃避光下有效期为 12 个月。28±2℃避光保存下有效期为 3 个月。 

6. 检测方法 

6.1 准备模板:采用模板稀释液按照试验要求稀释模板。 

6.2 H-SIA 等温扩增:取 1.5 ml 离心管放入 1 H-SIA 球,加入引物探针,加入 45.5 µl 板(终体积为 50ul),轻弹几次混匀。后 42℃孵育 20 min注:F/R 引物推荐用量:10 µM,各加入 1-2µl探针推荐用量:500-1000 ng/T。可根据要求进行调整。 

6.3 CRISPR 剪切反应:将 1 CRISPR 冻干球放入 8 反应管中,加入 45 ul 水溶解,加入 crRNA,加入 5uL 等温扩增产物,上下颠倒混匀后离心。后将 8 联排放于荧光定量 PCR 中, 37℃孵育 20 min 进行 CRISPR 反应。 注:crRNA 推荐用量:100-500 ng/T。可根据体系进行调整。 检测通道可根据引物探针不同进行更改。 

6.4 试纸条显色:取 80 µl 6.3 反应溶液放入反应管中(酶标板、1.5 ml 离心管等),将试纸 条红色端放入液体中,2 min 后判读结果。 

7. 检的结果判读 本试剂盒结果判读采用“消线法”方式,即 C 线 T 线同时显色为阴性结果,仅 C 线显色为阳性结果,C 线不显色结果无效。(注:T 线为靠下端插入液体处。) 阳性结果表示:样本中可能存在检测的病毒核酸,应结合临床症状判断感染状态。

8.注意事项 

8.1 本试剂用于体外检测,仅供科研使用,使用前请仔细阅读本说明书。 

8.2 本试剂盘应严格按照说明书要求储存,必需在有效期内使用。 

8.3 应按说明书严格进行操作,请勿混合使用不同批次组分。 

8.4 操作失误或样本量过少都有可能导致检测结果出现偏差。 

8.5 如果试剂盒包装损坏、有破损、漏气等,请不要使用该产品。 

8.6 试剂袋中的样本处理液、干燥剂不得吞服。 

8.7 模板稀释液中含有少量防腐剂,可能对皮肤和眼睛造成刺激。如果该溶液接触到皮肤或 眼睛,立即用大量清水冲洗。 如发生皮肤刺激或皮疹,应及时就诊。 

8.8 操作时应注意做好安全防护措施,使用前后清洗或消毒双手

版权所有:默瑞(上海)生物科技有限公司   

技术支持:易动力网络